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白血病，俗稱“血癌”，是一類造血干細(xì)胞惡性克隆性疾病。在白血病患者體內(nèi)，這些造血干細(xì)胞發(fā)生惡變，瘋狂增殖，抑制了正常血細(xì)胞的生成。骨髓移植雖然為白血病患者帶來了一線生機(jī)，但其背后的艱辛，也不言而喻。研發(fā)人員從未停止對(duì)白血病的研究。藥物研究所，通過制備白細(xì)胞腫瘤的單細(xì)胞懸液，進(jìn)行流式分析，深入了解腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡和免疫表型等特征，能夠更加精準(zhǔn)地篩選有效的治療藥物，開發(fā)創(chuàng)新的治療方法，為白血病患者帶來更多的生存希望。
實(shí)驗(yàn)設(shè)備：
單細(xì)胞懸液制備儀 JX-CKSM-4WK
小鼠皮下瘤單細(xì)胞制備上流式實(shí)驗(yàn)如下：
01、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
將MV4-11急性髓系白血病細(xì)胞接種到裸鼠背部皮膚上，形成皮下瘤，2-3周后腫瘤大小生長至1-1.5cm左右，可以進(jìn)行單細(xì)胞懸液制備，然后進(jìn)行流式分析。
02、樣品準(zhǔn)備
單細(xì)胞懸液制備儀一臺(tái)，接種MV4-11急性髓系白血病細(xì)胞的裸鼠一只、40um細(xì)胞篩、離心管、低溫水平離心機(jī)、消化酶試劑盒等
03、單細(xì)胞制備步驟
1、將接種MV4-11急性髓系白血病細(xì)胞的裸鼠斷頸處死，取下腫瘤。
2、待腫瘤剝離完畢后，將腫瘤轉(zhuǎn)移至加入預(yù)冷1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，用眼科剪將腫瘤組織剪碎。
3、將剪碎的腫瘤組織轉(zhuǎn)移至儀器配套的消化管，加入配套的消化酶，放入儀器中，選擇對(duì)應(yīng)的程序進(jìn)行制備。
4、下機(jī)后加入終止液，用40um的細(xì)胞篩（或200目紗布）過濾，過濾后放入離心機(jī)離心。
5、離心后棄上清，用緩沖液重懸細(xì)胞，并調(diào)整細(xì)胞濃度至1x107/mL。實(shí)驗(yàn)樣品圖
實(shí)驗(yàn)效果：
樣品研磨前后效果圖
制備好的單細(xì)胞懸液進(jìn)行染色，染色后上流式，對(duì)細(xì)胞的免疫表型特征進(jìn)行詳細(xì)分析，確定細(xì)胞的類型和分化狀態(tài)。更精準(zhǔn)地認(rèn)識(shí) MV4 - 11 細(xì)胞，對(duì)白血病的診斷、治療以及發(fā)病機(jī)制進(jìn)行探究。
單細(xì)胞制備儀是一種集成金屬浴消化與溫和剪切組織的新一代單細(xì)胞細(xì)胞懸液制備設(shè)備，應(yīng)用于流式細(xì)胞術(shù)/單細(xì)胞測序/原代細(xì)胞培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn)，具有起始組織量小，時(shí)間短，細(xì)胞得率高，細(xì)胞活性高的特點(diǎn)。采用國際DIN方法設(shè)計(jì)，低噪音，使用方便，性能穩(wěn)定，對(duì)樣品的消化處理過程始終處在恒溫狀態(tài)。
