背景:益生菌制劑(的深加工與長期保藏通常依賴于冷凍干燥技術。然而,在凍干前,發酵液中的活菌濃度較低且含有大量水分,直接凍干效率低下、能耗高,且容易在冰晶形成過程中對菌體造成機械損傷,導致存活率下降。低溫真空離心濃縮技術能有效解決這一問題。其原理是在低溫和真空雙重條件下,通過離心力防止樣品暴沸,同時利用真空降低溶劑沸點,使水分在遠低于常溫的溫度下溫和蒸發。

此方法能快速、高效地濃縮菌懸液,提高菌體密度,減少后續凍干體積,從而縮短凍干時間,并最大限度地減少因熱效應和冰晶生長對益生菌活性的損害,為獲得高活性益生菌凍干粉奠定基礎。本次實驗旨在評估使用低溫真空離心濃縮儀對益生菌發酵液進行預濃縮的可行性與初步效果。
實驗過程:
1.樣品前處理
使用5g酵母粉加入100 mLPBS溶液,使用手持勻漿儀混勻
2.物料準備
準備兩個5 mL樣品(50 mL離心管)
3.參數設置
打開真空離心濃縮儀,設置參數 1500rpm,時間4h,溫度4℃樣品管對稱放入轉子并啟動程序。運行約1小時后,觀察各管中液體體積均縮減至約3 mL。立即停止程序,釋放真空。
4.濃縮過程
打開油泵和冷阱,設置制冷,溫度降到-70℃,點擊啟動,開始離心。實驗結束,酵母均直接濃縮成干粉。
實驗效果:

實驗前后對比圖
儀器優勢:本次實驗成功利用低溫真空離心濃縮儀對益生菌發酵液進行了溫和的濃縮。
1.工藝有效性
該方法能在較低溫度(4℃)下,將樣品體積快速濃縮,大大提高了單位體積內的菌體密度,達到了預期濃縮目標。
2.活性保護關鍵
低溫環境與真空條件的結合,避免了傳統加熱濃縮或常溫蒸發可能引起的熱脅迫和氧化損傷,初步活菌計數結果表明對益生菌活性的影響較小,證明了該技術用于熱敏感生物樣品濃縮的優越性。
3.為下游工藝賦能
濃縮后的高濃度菌懸液體積小,有利于后續與凍干保護劑高效混合,并大幅縮短冷凍干燥周期,潛在降低了整體能耗并有望提高最終凍干粉的活菌存活率。

